巩毓震细菌透射电镜样品制备视频教程

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细菌透射电镜（TEM）是一种研究细菌结构和功能的重要工具。 细菌细胞通常太小，无法直接观察到。因此，制备适合观察的样品是制备TEM样品的第一个关键步骤。本文将为您介绍如何制备细菌TEM样品，以便您能够更好地了解这个话题。

我们需要准备所需材料：

1. 细菌：大肠杆菌（E. coli）或其他您想要研究的细菌。
2. 样品制备试剂：氯化钙（CaCl2）、乙醇（ethanol）和石炭酸铅（2-mercaptoethanesulfonic acid，MS）等。
3. 细胞死亡试剂：如甲苯胺盐酸盐（Tollens reagent）或氯胺盐酸盐（Murashige and Mitscher reagent）等。
4. 透射电镜样品制备试剂：透射电镜网格（透电细网格）、聚丙烯酰胺纤维（PAM）和胆固醇（cholesterol）等。
5. 扫描电镜（SEM）样品制备试剂：如硫磺酸盐（sulfuric acid）和二氧化硅（SiO2）等。

接下来，我们将在这里详细介绍如何制备细菌TEM样品：

1. 准备细菌样品： 从试管中取出大肠杆菌，并将试管轻轻振荡，以使细胞均匀分布。接下来，将试管放入培养箱中，使其在37°C下生长。
2. 制备细胞死亡试剂：将甲苯胺盐酸盐或氯胺盐酸盐加入细菌样品中，使其在一定的浓度下作用一段时间。这将导致细胞死亡，并使细胞变得透明。
3. 处理细胞：将细菌样品放入离心机中，将其离心至适当的密度。接下来，将离心管放入冰冻箱中，冷冻至低于0°C。
4. 解冻并处理：将冷冻的细菌样品放入室温下，等待其解冻。接下来，将解冻的细菌样品与透射电镜网格混合，使其均匀分布。
5. 样品固定：将透射电镜样品固定在支持物上，以防止在观察过程中样品移动。
6. 样品观察：使用扫描电镜观察样品。您可以通过调整样品的电压和电流来获得最佳图像。
7. 分析：使用图像处理软件分析TEM图像，以提取有关细菌结构的信息。

需要注意的是，在制备过程中，应严格遵守实验室操作规程，并确保所有试剂和设备都达到相应的灭菌标准。这将是制备出高质量TEM样品的关键。

通过遵循上述步骤，您可以成功制备适合观察的大肠杆菌TEM样品。这将帮助您深入了解细菌的形态和功能，为您的研究提供有价值的数据。

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